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协同刺激分子B7-H1和B7-H3在食管癌中表达的临床意义及作用研究

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协同刺激分子B7-H1和B7-H3在食管癌中表达的临床意义及作用研究
论文目录
 
中文摘要第1-6页
Abstract第6-13页
研究背景第13-31页
1 食管癌和协同刺激分子概述第14-16页
2 协同刺激分子B7-H1和肿瘤免疫第16-18页
  2.1 B7-H1/PD-1 的定位、表达及其在肿瘤免疫应答中的作用第16-17页
  2.2 肿瘤细胞表达B7-H1与EMT的关系及潜在作用机制第17-18页
  2.3 PD-1/B7-H1逆向信号在肿瘤细胞抗凋亡及肿瘤细胞EMT中的作用第18页
3 协同刺激分子B7-H3和肿瘤免疫第18-23页
  3.1 B7-H3的定位、结构、表达及其生物学功能第18-20页
  3.2 B7-H3 在肿瘤中表达的临床意义及其对肿瘤微环境中免疫细胞亚群的影响第20-21页
  3.3 干预肿瘤细胞 B7-H3 信号对肿瘤细胞生物学行为的影响第21-23页
参考文献第23-31页
第一部分 协同刺激分子B7-H1在食管癌组织中表达的 临床意义及作用研究第31-46页
1 主要试剂、材料与仪器设备第31-32页
  1.1 试剂第31-32页
  1.2 病例第32页
  1.3 主要仪器设备第32页
2 实验方法第32-34页
  2.1 细胞培养第32页
  2.2 流式细胞术检测及分析第32-33页
  2.3 组织芯片制备第33页
  2.4 Bench Marker全自动免疫组化仪检测B7-H1的表达第33页
  2.5 E-cadherin及Vimentin免疫组织化学染色第33页
  2.6 B7-H1、E-cadherin及Vimentin免疫组织化学染色结果评估第33-34页
  2.7 学处理第34页
3 结果第34-40页
  3.1 B7-H1在食管癌组织、食管正常组织中的表达第34页
  3.2 B7-H1在食管癌组织中的表达水平和患者临床参数的关系第34-35页
  3.3 B7-H1在食管癌组织中的表达水平与患者预后的关系第35-36页
  3.4 B7-H1在食管癌细胞核内的表达与患者临床参数及预后的关系第36-37页
  3.5 E-cadherin 和 Vimentin 在食管癌组织中表达水平和患者临床参数的关系第37页
  3.6 EMT 在食管癌组织中的发生情况与患者临床参数的关系第37-38页
  3.7 EMT在食管癌组织中的发生情况与患者预后的关系第38-39页
  3.8 食管癌组中EMT发生对B7-H1表达水平的影响第39-40页
4 讨论第40-43页
参考文献第43-46页
第二部分 协同刺激分子B7-H3在食管癌组织中表达的临床意义及作用研究第46-66页
1 主要试剂、材料与仪器设备第47-48页
  1.1 试剂第47页
  1.2 病例第47-48页
  1.3 主要仪器设备第48页
2 实验方法第48-56页
  2.1 流式细胞术检测及分析第48页
  2.2 B7-H3及CD3免疫组织化学染色第48-49页
  2.3 B7-H3及CD3免疫组织化学染色结果评估第49页
  2.4 B7-H3-si RNA慢病毒载体构建及相关试剂第49-50页
  2.5 目的细胞慢病毒感染第50页
  2.6 流式分选第50页
  2.7 总RNA抽提第50-51页
  2.8 cDNA合成第51页
  2.9 cDNA目的片段克隆第51页
  2.10 荧光定量PCR检测细胞株中B7-H3表达水平第51-52页
  2.11 Western blot检测第52-54页
  2.12 CCK-8 检测细胞增殖第54-55页
  2.13 克隆形成实验第55页
  2.14 划痕实验第55页
  2.15 Transwell侵袭实验第55-56页
  2.16 学处理第56页
3 结果第56-62页
  3.1 B7-H3在人食管癌细胞株中的表达第56-57页
  3.2 B7-H3在食管癌组织、食管正常组织中的表达第57页
  3.3 B7-H3在食管癌组织中表达水平的临床相关性第57-58页
  3.4 B7-H3在食管癌组织中的表达水平与患者预后的关系第58-59页
  3.5 稳定转染慢病毒载体的人食管癌细胞株Eca-109的鉴定第59页
  3.6 m RNA及蛋白水平检测稳定转染细胞株中B7-H3的表达第59-60页
  3.7 CCK-8 实验比较各稳定转染细胞株的增殖能力第60页
  3.8 克隆形成试验比较各组稳定转染株克隆形成能力第60-61页
  3.9 划痕法测定B7-H3对食管癌细胞迁移能力的影响第61-62页
  3.10 Transwell法测定B7-H3对食管癌细胞侵袭转移能力的影响第62页
4 讨论第62-64页
参考文献第64-66页
第三部分 转录因子T-BET在胃癌组织中的表达及其与预后的关系第66-85页
1 材料第68-69页
  1.1 标本收集及临床资料第68页
  1.2 实验试剂第68-69页
  1.3 主要仪器设备第69页
2 实验方法第69-71页
  2.1 免疫组织化学染色步骤第69页
  2.2 免疫组化染色结果判断标准第69-70页
  2.3 胃癌浸润TILs的分离第70页
  2.4 抗体标记及流式检测第70页
  2.5 学处理第70-71页
3 结果第71-75页
  3.1 T-bet阳性淋巴细胞在胃炎、胃息肉、胃癌及癌旁正常组织中的浸润第71-72页
  3.2 胃癌组织中T-bet阳性淋巴细胞的浸润与患者临床病理参数的关系第72-73页
  3.3 T-bet表达与生存期的关系第73页
  3.4 胃癌生存期的COX多因素分析第73-74页
  3.5 T-bet+淋巴细胞在外周血中的亚群分析第74页
  3.6 胃癌及癌旁正常组织中T-bet+浸润淋巴细胞的亚群分析第74-75页
4 讨论第75-80页
参考文献第80-85页
总结和展望第85-87页
1 总结第85-86页
2 展望第86-87页
综述第87-101页
参考文献第95-101页
本研究所获的基金资助第101-102页
攻读博士学位期间公开发表的论文第102-104页
缩写词表第104-105页
致谢第105-106页

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