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三分三莨菪碱6β-羟基化酶的功能鉴定

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三分三莨菪碱6β-羟基化酶的功能鉴定
论文目录
 
摘要第1-9页
abstract第9-12页
第一章 文献综述第12-21页
  · 托品烷生物碱概况第12-16页
    · 莨菪烷生物碱的合成途径第14-16页
    · 莨菪烷类生物碱代谢工程研究进展第16页
  · 莨菪碱6 β- 羟化酶(H6H)第16-17页
  · 三分三植物性状概述第17-19页
  · 课题研究目的及意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-31页
  · 实验材料第21-23页
    · 载体和菌种第21页
    · 主要仪器设备第21-22页
    · 试剂及药品第22页
    · 常用试剂第22-23页
  · 主要常规试剂及方法第23-31页
    · 原核表达载体的构建第23-25页
    · AaH6H在E.coli中的表达第25-26页
      · His-AaH6H在E.coli中的表达第25-26页
      · GST-AaH6H在E.coli 中的表达第26页
    · AaH6H 蛋白的纯化第26-27页
      · His-AaH6H 蛋白的纯化第26-27页
      · GST-AaH6H 蛋白的纯化第27页
    · 重组蛋白的Western Blot分析第27-28页
      · His-AaH6H蛋白的Western Blot分析第27-28页
      · GST-AaH6H蛋白的Western Blot分析第28页
    · 重组菌株对莨菪碱的转化第28-29页
      · 包含pET30a-AaH6H质粒的重组菌株对莨菪碱的生物转化第28-29页
      · 包含pGEX4T-1-AaH6H质粒的重组菌株对莨菪碱的生物转化第29页
    · 托品烷莨菪碱的GC分析第29-30页
      · 托品烷莨菪碱标准品的GC分析第29-30页
      · 诱导后培养基中托品烷莨菪碱的GC分析第30页
    · 诱导后培养基托品烷莨菪碱的MS分析第30-31页
第三章 结果与讨论第31-45页
  · AaH6H在E.coli中的表达纯化及性质研究第31-45页
    · 表达载体的构建第31-33页
    · AaH6H在E.coli中的表达第33-35页
      · His-AaH6H在E.coli中的表达第33-34页
      · GST-AaH6H在E.coli中的表达第34-35页
    · AaH6H 蛋白的纯化第35-37页
      · His-AaH6H的蛋白纯化第35-36页
      · GST-AaH6H 的蛋白纯化第36-37页
    · 重组表达AaH6H 蛋白的 Western Blot分析第37-39页
      · His-AaH6H的Western Blot分析第37-38页
      · GST-AaH6H的Western Blot分析第38-39页
    · AaH6H 的性质分析第39-45页
      · 莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪碱标准品的GC 图谱第39-40页
      · 重组细胞转化产物的鉴定第40-42页
      · 重组细胞转化后产物的质谱分析第42-43页
      · 重组大肠杆菌对莨菪碱的转化效率分析第43-45页
第四章 总结与展望第45-47页
  · 研究结论第45-46页
  · 后续研究方向第46-47页
参考文献第47-53页
硕士期间发表的论文及成果第53-54页
致谢第54 页

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